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快速制备液相色谱主要由以下五个系统组成
点击量:307     时间:2021-01-23
  快速制备液相色谱主要有进样系统、数据处理系统、分离系统、输液系统和检测系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。
  
  1、进样系统:一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的;
  2、数据处理系统:该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展;
  3、分离系统:该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm,内径为2~5mm,由"不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相。固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍,或者用化学法偶联各种基因或配体的有机化合物。因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性;
  4、输液系统:该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质都能获得有效分离;
  5、检测系统:快速制备液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。
  a、紫外检测器该检测器适用于对紫外光有吸收性能样品的检测。其特点:使用面广;灵敏度高;线性范围宽;对温度和流速变化不敏感;可检测梯度溶液洗脱的样品;
  b、示差折光检测器凡具有与流动相折光率不同的样品组分,均可使用示差折光检测器检测。目前,糖类化合物的检测大多使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单,但灵敏度低,流动相的变化会引起折光率的变化,因此,它既不适用于痕量分析,也不适用于梯度洗脱样品的检测;
  c、荧光检测器凡具有荧光的物质,在一定条件下,其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此,这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物的测定,其灵敏度很高,痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。

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