TLC板实验步骤：

　　1、切割薄板。 通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置。借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进行玻璃切割。当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。

　　2、选取合适的溶剂体系。 化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端， Rf值*在0.15~0.85之间。虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标。那么，应该选取哪些溶剂呢?一些标准溶剂和他们的相对极性列于如下：

　　强极性溶剂： 甲醇>乙醇>异丙醇

　　中等极性溶剂： 乙氰>乙酸乙酯>CHCl3>二氯甲烷>C4H10O>甲苯

　　非极性溶剂： 环己烷，石油醚，己烷，戊烷

　　3、将1~2mL选定的溶剂体系倒入展开池中，在展开池中放置一大块滤纸 。

　　4、将化合物在标记过的基线处进行点样。 我们用的点样器是买来的，此外，点样器也可从加热过的Pasteur吸管上拔下。在跟踪反应进行时，一定要点上起始反应物、反应混合物以及两者的混合物。

　　5、展开： 让溶剂向上展开约90%的薄板长度。

　　6、从展开池中取出薄板并且马上用铅笔标注出溶剂到达的前沿位置。 根据这个算Rf数值。

　　7、让薄板上的溶剂挥发掉。

　　8、用非破坏性技术观察薄板。 *的非破坏性方法就是用紫外灯进行观察。将薄板放在紫外灯下，用铅笔标出所有有紫外活性的点。尽管在5.301中不用这种方法，但我们将采用另一常用的无损方法--用碘染色法。

　　9、用破坏性方式观测薄板。 当化合物没有紫外活性的时候，只能采用这种方法。在5.301中，提供了很多非常有用的染色剂。使用染色剂时，将干燥的薄板用镊子夹起并放入染色剂中，确保从基线到溶剂前沿都被浸没。用纸巾擦干薄板的背面。将薄板放在加热板上观察斑点的变化。在斑点变得可见而且背景颜色未能遮盖住斑点之前，将薄板从加热板上取下。

　　10、根据初始薄层色谱结果修改溶剂体系的选择。 如果想让Rf变得更大一些，可使溶剂体系极性更强些;如果想让Rf变小，就应该使溶剂体系的极性减小些。如果在薄板上点样变成了条纹状而不是一个圆圈状，那么你的样品浓度可能太高了。稀释样品后再进行一次薄板层析，如果还是不能奏效，就应该考虑换一种溶剂体系。

　　11、做好TLC标记，计算每个斑点的Rf值，并且在笔记本中画出图样。