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薄层层析硅胶板使用说明
点击量:1224     时间:2019-07-18

乐研化学薄层层析硅胶板涂层的主要成分为SiO2.nH2O,化学性质稳定,除强碱外,不与其他酸碱反应。具有分离效果好,塔板数高,点样斑点小,分离时间短,灵敏度高,斑点清晰,不扩散等特点;适用于医药,化工,生化,环保等系统的科研和检测;对于某些微量以及成分复杂的化合物有很好的分离效果,适用于定性和半定量分析。

经典操作和注意事项:

1、点样 

分析板:

点样一般为圆点(不能太大),点样基线距底边0.5~1.0 cm,点样直径为1~2 mm,点间距离约为0.5~1.0 cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜;

注意事项:

(1)配制样品溶液时应选用对组分溶解度较好的溶剂;溶剂的粘度不宜过高,以便于点样;溶剂的沸点要适中,沸点过低,样品溶液中溶剂易挥发,会改变溶液浓度导致较大误差。沸点过高,会使样品溶液的溶剂残留于原点,导致展开剂极性异常变化,常用的溶剂为甲醇;

(2)点样时要控制力度,避免损伤涂层表面;

(3)点样后必须待溶剂挥发完全后,再进行展开,但要避免长时间高温加热,以免改变待测组分的性质。

制备板:

取一块制备板,在距离底部2~3?cm处用铅笔画一条直线;取一次性滴管,在吸管口处嵌入适量脱脂棉后吸入待分离样品溶液,沿着制备板上的基线均匀移动,然后用吹风机吹干,反复操作,直至上样完成;将制备板置于展开缸中,硅胶面背对展缸玻璃面;展开结束后,取出、晾干,在紫外灯下面用铅笔标出所需的色带,用刮刀刮下,选择大极性溶剂,浸泡搅拌1~2小时,过滤、洗涤、旋干即可。

注意事项:

(1)待分离的样品必须在硅胶中稳定;且难溶性样品不适合此方法;

(2)上样量的计算方法:1 mm厚的硅胶板的负载量不要超过5 mg/cm3。以20*20?cm,厚度为1 mm厚硅胶板为例:若上样带宽是0.5?cm,板子两边空出0.5?cm边际,上样量约为0.5*19*5=47.5 mg,以此类推;

(3)基线必须保持在展开剂的液面以上,防止待分离样品溶于展开剂;

(4)为保证溶出效率,需将刮下的硅胶碾碎。安全起见,操作者应带口罩,在风速小的环境下进行;

(5)浸泡硅胶常用的溶剂是二氯甲烷/甲醇:20/1~10/1,注意不能超过这个比例,否则硅胶中的部分物质会被溶解;

(6)制备板展开前后,所有使用的容器都要确保干净,尽量避免使用真空油脂;

2、展开剂

(1)化合物分离效率大小用Rf(化合物距离基线的距离除以溶剂的前沿距基线的距离)值表达,Rf值在0.15~0.85之间,尽量控制主要物质Rf值在0.3~0.7之间,Rf值与展开剂的相对极性有密切关系。其中常用溶剂的极性顺序如下:水(大)>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇>丙酮>二氧六环>甲乙酮>正丁醇>乙酸乙酯>异丙醚>二氯甲烷>三氯甲烷>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>己烷>煤油(小);

(2)展开剂的选择:单一的溶剂往往不能达到很好的分离效果,正常使用混合溶剂即高极性与低极性组成的混合体系(不限于2种,有可能是3种以上,根据底物的性质决定),常用的溶剂组合有:石油醚/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇、石油醚/丙酮、石油醚/二氯甲烷、乙酸乙酯/甲醇、乙酸乙酯、乙酸乙酯、乙腈/水等,具体比例要结合实际情况,或参考文献中报道的展开剂配比;

(3) 薄层层析硅胶板展开过程中部分样品会有拖尾现象,主要是因为样品具有酸或碱的化学成分,且部分在溶液中电离,展开时存在分子,离子两种状态,主要解决方法是:若样品酸性比较大,一般在展开剂中加酸(0.1%~0.5%甲酸,乙酸);若样品碱性比较大,一般在展开剂中加碱(0.1%~0.5%氨水,三乙胺)。

3、展开室

薄层展开室需预先用展开剂饱和,可在室中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封室顶的盖,使系统平衡。将点好样品的薄层层析硅胶板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5~1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,待展开至规定距离,取出薄层板,晾干,并进行后续的检验。

4、常用显色剂及其配制方法

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5、储存与活化

薄层层析硅胶板具有很强的吸湿性,应存放于密封干燥处,请勿与易挥发性物质一起存放。拆封后未用完的硅胶板应立刻密封,以免吸潮或吸附其他化学物质而影响分离性能;若硅胶板吸潮,可活化后再使用(放置于110oC的烘箱中,烘30分钟)

6、安全防护措施

薄层层析硅胶板的使用中需要全程带手套,若不小心被玻璃板划伤,可参考如下方式做紧急处理:

(1)若伤口不大不深,出血不多,伤口干净,可用酒精消毒伤口周围,不要将消毒液弄进伤口内,待干后用消毒纱布覆盖包扎,或用创可贴粘贴;

(2)若伤口不干净,要先用碘酒沿周围皮肤消毒一次,再用酒精消毒两次,然后用少量生理盐水冲洗伤口,冲洗时用药棉轻轻擦拭伤口,去除异物,后再对伤口周围的皮肤进行再一次消毒,并用纱布覆盖包扎;

(3)若伤口较深,接触到化合物,还须速去医院,进行专业的医护处理,必要时注射破伤风育苗。

联系人:李明星 地址:上海市浦东新区张江镇张衡路1999弄3号楼

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